Dulbeccon PBS: ää ja PBS: ää

Anonim

DPBS vs. PBS

PBS tai fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos (DPBS) ovat puskuroituja suolaliuoksia, joita käytetään biologisissa tutkimuksissa. PBS: ää ja DPBS: ää käytetään tutkimuksissa, joissa soluja käytetään. Liuoksen ionipitoisuus ja osmolaarisuus ovat isotonisia, toisin sanoen se on yhteensopiva ihmiskehon kanssa. Puskurin avulla saadaan aikaan ja säilytetään stabiili pH 7,2-7,6.

PBS: n ja DPBS: n välillä ei ole merkittävää eroa. Molemmat sisältävät natriumfosfaattia, natriumkloridia ja tarvittaessa kaliumfosfaattia ja kaliumkloridia. Muut valmisteet, kuten DPBS, voivat sisältää tai eivät saa sisältää kalsiumia ja magnesiumia. PBS: llä ja DPBS: llä on lukuisia sovelluksia, koska ne eivät ole soluille haitallisia. Sekä PBS: ää että DPBS: ää voidaan käyttää solujen kanssa kontaminoitujen instrumenttien tai säiliöiden huuhtelemiseen. Molempia voidaan myös käyttää laimentavissa aineissa. Vesimolekyylit laimennusaineissa, kuten proteiini, pysäytetään ja kuivataan. Vesi, joka yhdistyy aineeseen, pitää aineen muuttumattomien muutosten, kuten denaturoinnin, läpi. Kalsium- ja magnesium-liuokset voivat rajoittaa trypsiinin aktiivisuutta. Ellipsometrissa proteiinin adsorptiota voidaan mitata ottamalla perusspektri PBS: n avulla.

Fosfaattipuskuroitua suolaliuosta lisäaineilla, kuten EDTA: lla, voidaan käyttää yhdistettyjen solujen erottamista. Saostuminen muodostuu, kun sinkkiä, kaksiarvoista metallia, lisätään PBS: ään, minkä vuoksi sitä ei voida lisätä solujen irrottamiseen. Tämän tyyppisessä tilanteessa käytetään hyväpuskuria sinkin sijasta.

Fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos valmistetaan lukuisilla tavoilla. Yksi tapa valmistaa se on liuottamalla 800 g. natriumkloridia, 20 g. kaliumkloridi, 2 molekyyliä vettä, 24 g. kaliumfosfaattia ja 144 g. natriumfosfaattia 8 litrassa tislattua vettä. Tulos on 10 litraa 10 x PBS. Suoraan mittaamaan PBS: n pH pH-mittarilla puskuroitujen liuosten valmistuksessa. Liuoksen pH on säädettävissä käyttämällä natriumhydroksidia tai kloorivetyhappoa. Fosfaattipuskuroitu suolaliuos laimennusaineena valmistetaan lopullisella pitoisuudella 10 mM fosfaatilla, 137 mM natriumkloridilla, 2,7 mM kaliumkloridilla ja pH-arvolla 7,4. Fritsch, Sambrook ja Maniatis ovat omalla tavallaan puskuri-ratkaisuja valmistettaessa kirjassaan "Molekyylikloonaus". Sitten valmistetta valmistetaan 800 ml: n litralla 1x PBS: llä. tislattua vettä. Sisällytä 8 g. natriumkloridia sekä 0,2 g. kaliumkloridia. 1,44 g. natriumfosfaattia, minkä jälkeen lisätään 0,24 g. kaliumfosfaattia. Aseta suolahappoon pH: n säätämiseksi arvoon 7,4. Saat 1 litran PBS: ää lisää tislattua vettä, kunnes tasoitus on enintään 1 litra. Poista tulokseksi saatu liuos alikvootiksi ja käytä autoklaavia liuoksen steriloimiseksi. Säädä autoklaavi 121 ° C: een ja autoklaavata se 20 minuutin ajan nesteyksikössä. Jälkeenpäin säilytä liuos huoneenlämmössä.

Vaikka fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos valmistetaan monin tavoin, sisältö on edelleen sama. Tästä huolimatta tulosten ja käyttötarkoitukset ovat edelleen samat, riippumatta siitä, miten niitä valmistellaan.

Yhteenveto:

1.PBS tai fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos (DPBS) ovat puskuroituja suolaliuoksia, joita käytetään biologisissa tutkimuksissa.

2. Liuoksen ionipitoisuus ja osmolaarisuus ovat isotonisia, eli ne ovat yhteensopivia ihmiskehon kanssa. Puskurin avulla saadaan aikaan ja säilytetään stabiili pH 7,2-7,6.

3. PBS: n ja DPBS: n välillä ei ole merkittävää eroa. Molemmat sisältävät natriumfosfaattia, natriumkloridia ja tarvittaessa kaliumfosfaattia ja kaliumkloridia. Muut valmisteet, kuten DPBS, voivat sisältää tai eivät saa sisältää kalsiumia ja magnesiumia.

4. PBS: tä ja DPBS: tä voidaan käyttää solujen kanssa kontaminoitujen instrumenttien tai säiliöiden huuhtelemiseen. Molempia voidaan myös käyttää laimentavissa aineissa. Vesimolekyylit laimennusaineissa, kuten proteiini, pysäytetään ja kuivataan. Vesi, joka yhdistyy aineeseen, pitää aineen muuttumattomien muutosten, kuten denaturoinnin, läpi. Kalsium- ja magnesium-liuokset voivat rajoittaa trypsiinin aktiivisuutta.Ellipsometrissa proteiinin adsorptiota voidaan mitata ottamalla perusspektri PBS: n avulla.

5.Fosfaattipuskuroitu suolaliuosta lisäaineilla, kuten EDTA: lla, voidaan erottaa solut. Saostuminen muodostuu, kun sinkkiä, kaksiarvoista metallia, lisätään PBS: ään, minkä vuoksi sitä ei voida lisätä solujen irrottamiseen. Tämän tyyppisessä tilanteessa käytetään hyväpuskuria sinkin sijasta.

6.PBS ja DPBS valmistetaan lukuisilla tavoilla. Vaikka fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos valmistetaan monin tavoin, sisältö on edelleen sama. Tästä huolimatta tulosten ja käyttötarkoitukset ovat edelleen samat, riippumatta siitä, miten niitä valmistellaan.